我国《慢性乙型肝炎防治指南 (2022 年版)》推荐意见10 对于血清HBV DNA阳性，ALT持续异常 (>ULN)，且排除其他原因所致者，建议抗病毒治疗(B1)。有读者来函询问，血清HBV DNA阳性是指定量下限 (LLOQ) 还是检测下限 (LLOD)。我们特请庄辉教授将其在一次全国性肝病会议上关于《HBV DNA定量下限 (LLOQ) 和检测下限 (LLOD) 的临床意义》报告整理成文，现发布如下，以飨读者。
一、什么是HBV DNA检测下限 (LLOD) 和定量下限 (LLOQ)
应用高灵敏HBV DNA定量试剂盒检测HBV DNA可能有以下4种结果：
① 无信号，即低于检测下限 (＜LLOD)；
② 有信号，但不能定量，即等于或高于检测下限，但低于定量下限 (≥LLOD~＜LLOQ)；
③ 获得最低定量值，即定量下限 (LLOQ)；
④ 等于或高于定量下限，但小于或等于高定量上限 (≥LLOQ~≤HLOQ)；
⑤ 高于定量上限 (＞HLOQ)，被检标本需稀释后方可获得HBV DNA准确定量 (图1)[1]。
图1 高灵敏HBV DNA定量试剂盒检测结果
二、HBV DNA定量下限 (LLOQ) 和检测下限 (LLOD) 的临床意义
1. 启动慢性乙型肝炎 (乙肝) 治疗的HBV DNA域值是≥LLOQ，而不是≥LLOD。
我国慢性乙型肝炎防治指南 (2022 年版) 推荐意见9提出，应尽可能采用以≥LLOQ为10~20 IU/ml高灵敏且检测线性范围大的HBV DNA检测试剂盒。我国《慢性乙型肝炎防治指南 (2022年版)》推荐意见10中， HBV DNA阳性是指≥LLOQ，对于血清HBV DNA≥LLOQ (不是≥LLOD)，ALT持续异常 (>ULN)，且排除其他原因所致者，建议抗病毒治疗；对于血清HBV DNA≥LLOQ者 (不是≥LLOD)，无论ALT水平高低，只要符合下列情况之一，建议抗病毒治疗：
① 有乙肝肝硬化家族史或HCC 家族史；
② 年龄>30 岁；
③ 无创指标或肝组织学检查，提示肝脏存在明显炎症 (G≥2) 或纤维化 (F≥2)；
④ HBV 相关肝外表现 (如 HBV 相关性肾小球肾炎等)[2]。
2. 自然史分期判断HBV DNA阳性或阴性是LLOQ，而不是LLOD[2]。
3. 功能性 (临床) 治愈和部分治愈的HBV DNA值是＜LLOQ，而不是＜LLOD。
2022年美国肝病学会和欧洲肝病学会联合召开的关于HBV-HDV治疗终点会议报告指出，功能性治愈的定义是停药后24周，HBsAg持续消失，HBV DNA＜LLOQ；部分治愈的定义是停药后24周，HBsAg持续＜100 IU/ml，HBV DNA＜LLOQ (图2)[3, 4]。
4. LLOQ是判断维持病毒学应答和完全病毒学应答的标准，而不是LLOD。
欧洲肝病学会2017年版对维持病毒学应答和完全病毒学应答的定义分别为<12 IU/ml和<10 IU/ml (图3)[5]，说明是以LLOQ为标准，而不是LLOD。
5. 低病毒血症 (LLV) 的HBV DNA下限是LLOQ，而不是LLOD。
Han等[6]和Kim等[7]将LLV的HBV DNA水平定为12~2000 IU/ml。美国肝病学会2018年版慢性乙肝指导将LLV的HBV DNA定为20~2000 IU/ml[8, 9]。说明两者均以LLOQ作为LLV的下限，不是LLOD。
6. 很低病毒血症 (VLLV) 的HBV DNA下限为LLOQ，而不是LLOD。
Zhang等[10]、Lu等[11]和丁银等[12]分别将VLLV的HBV DNA定为10~19 IU/ml、9~20 IU/ml和＞5~10 IU/ml但＜20 IU/ml，表示VLLV的HBV DNA下限均为LLOQ，而不是LLOD。
但值得指出的是：在供血员筛查时，则以LLOD为标准，不能以LLOQ为标准，如供血员筛查HBV DNA≥LLOD，则可能有传染性，不能献血[13, 14]。
三、为什么临床上多用LLOQ评价HBV DNA水平
临床上，在作出诊治决策前，应综合考虑方法学、疾病特点、诊疗判断等因素，因此，应用临床灵敏度 (clinical sensitivity)，或称功能灵敏度 (functional sensitivity)，或诊断灵敏度 (diagnostic sensitivity)，而不是用分析灵敏度 (analytical sensitivity)[15]。
Chevaliez等[16]指出，按照定义，LLOQ是在定量动态范围内，因此，LLOQ是精确的和可重复的，而LLOD是统计学定义，其显示的患者和样本的核酸实际含量是变化的，因此，LLOD不适用于做出个体化的治疗决策。目前，还是应用LLOQ，以便作出精确评价 (图4)。
图4 LLOD不适用于作出个体化治疗决策
[1] APHI (Association of Public Health Laboratories). Use and interpretation of quantitative HIV-1 RNA test results: Duidance for laboratories. www,aphi.org.
[2] 中华医学会肝病学分会, 中华医学会感染病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南 (2022 年版)[J]. 中华肝脏病杂志, 2022, 30(12):1309-1331. DOI：10.3760/cma.j.cn501113-20221224-00607.
[3] Ghany MG, Buti M , Lampertico P, et al. Guidance on treatment endpoints and study design for clinical trials aiming to achieve cure in chronic hepatitis B and D: Report from the 2022 AASLD-EASL HBV-HDV Treatment Endpoints Conference[J]. J Hepatol, 2023, 79(5):1254-1269. DOI: 10.1016/j.jhep.2023.06.002.
[4] Moini M, Fung S. HBsAg loss as a treatment endpoint for chronic HBV infection: HBV cure[J]. Viruses, 2022, 14(4): 657. DOI: 10.3390/v14040657.
[5] European Association for the Study of the Liver. EASL 2017 Clinical Practice Guidelines on the management of hepatitis B virus infection[J]. J Hepatol, 2017, 67(2):370-398. DOI: 10.1016/j.jhep.2017.03.021.
[6] Han JJ, Guo YF, Zhang JM, et al. Prevalence and associated factors of low-level viremia in chronic hepatitis B Patients after long-term therapy with nucleos(t)ide analogs[J]. Turk J Gastroenterol, 2023, 34(1):53-61. DOI: 10.5152/tjg.2023.21978.
[7] Kim JH, Sinn DH, Kang W, et al. Low-level viremia and the increased risk of hepatocellular carcinoma in patients receiving entecavir treatment[J]. Hepatology, 2017, 66(2):335-343. DOI: 10.1002/hep.28916.
[8] Terrault N, Lok AS, McMahon BJ, et al. Update on prevention, di agnosis, and treatment and of chronic Hepatitis B: AASLD 2018 Hepatitis B Guidance[J]. Hepatology, 2018, 67(4):1560-1599. DOI: 10.1002/hep.29800.
[9] Li ZB, Li L, Niu XX, et al. Switching from entecavir to tenofovir alafenamide for chronic hepatitis B patients with low-level viraemia[J]. Liver Int, 2021, 41(6):1254-1264. DOI: 10.1111/liv.14786.
[10] Zhang Q, Cai DC, Hu P, et al. Low-level viremia in nucleoside analog- treated chronic hepatitis B patients[J]. Chin Med J (Engl), 2021, 134(23):2810-2817. DOI: 10.1097/CM9.0000000000001793.
[11] Lu JH, Zhang CN, He PY, et al. Risk factors for very low-level viremia in patients with chronic hepatitis B virus infection: A single-center retrospective study[J]. Liver Res, 2022, 6(1):39-44. DOI: 10.1016/j.livres.2022.02.001.
[12] 丁银, 敖玲, 张大志等. 很低病毒血症：抗乙型肝炎病毒治疗过程中需要关注的临床新问题[J]. 中华肝脏病杂志, 2021, 29(12):1147-1150. DOI：10.3760/cma.j.cn501113-20210830-00442.
[13] Shang GF, Seed CR, Wang F, et al. Residual risk of transfusion-transmitted viral infections in Shenzhen, China, 2001 through 2004[J]. Transfusion, 2007, 47(3):529-539. DOI: 10.1111/j.1537-2995.2006.01146.x.
[14] Yi M, Dai SC, Fang L, et al. Influence of occult hepatitis B infection on blood transfusion safety and its countermeasures[J]. Pathogens, 2025, 14(4), 301. DOI: 10.3390/pathogens14040301.
[15] Abdel GMT, El-Masry MI. Verification of quantitative analytical methods in medical laboratories[J]. Med Biochem, 2021, 40 (3):225-236. DOI: 10.5937/jomb0-24764.
[16] Chevaliez S, Rodriguez R, Pawlotsky JM. New virologic tools for management of chronic hepatitis B and C[J]. Gastroenterology, 2012, 142(6):1303-1313.e1. DOI: 10.1053/j.gastro.2012.02.027.
以上文章来源于中华肝脏病杂志，作者中华肝脏病杂志
简体中文
ENGLISH
