施晓雷 韩冰 张悦 顾劲扬 褚薛慧 肖江强 檀家俊 丁义涛
【摘要】 目的 对本研究所构建新型生物人工肝体外支持系统(BAL)应用中,猪内源性逆转录病毒(PERV)的安全性进行验证。 方法 正常比格犬接受新型BAL治疗6h,定时收集BAL系统中的血浆及比格犬的全血。提取外周血单核细胞(PBMCs)和血浆中的DNA和RNA进行PCR和RT-PCR检测PERV和猪细胞色素B序列。检测血浆中的逆转录酶(RT)活性以及血浆的体外感染能力。 结果 比格犬治疗期间均体征平稳并生存至治疗后6个月。仅在BAL内含反应器的循环3中查出PERV RNA和RT活性阳性,包括PBMCs和其他血浆在内的其余样本均未见PERV RNA,PERV DNA和RT活性。在体外感染实验中并无HEK293细胞感染病毒。结论 新型BAL并不会导致PERV传播。
【关键词】 内源性逆转录病毒;肝,人工;肝细胞;骨髓祖代细胞;多层辐向流动生物反应
生物人工肝支持系统(bio-artificial liver, BAL)以其特有的生物学功能备受关注[1]。目前,猪肝细胞因其充足的来源、方便的可获性以及与人肝细胞相似的特点是BAL的主要细胞来源[2]。但猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus, PERV)的传播一直是猪源性生物人工肝必须排除的问题。 体内研究显示种植猪胰岛细胞导致了非肥胖精尿病重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠感染PERV[3]。 研究表明,我
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